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GPCR ASSAYS ImageXpressMICRO
さらに詳しくはこちら(英語サイト) ImageXpressULTRA
Transfluorは、GPCR(Gタンパク質共役受容体)を制御するリガンドや化合物のスクリーニングに利用する細胞ベースのハイコンテンツイメージングアッセイです。
  • .細胞ベースの蛍光イメージスクリーニング
  • ほとんどのGPCRで利用可能
  • オーファンのGPCRのスクリーニングに対応


GPCR(Gタンパク質共役受容体)がリガンドに反応すると、GPCRが脱感作を起こす経路が知られています。ここでは、GRK(Gタンパク質共役受容体リン酸化酵素)がGPCRのC末端をリン酸化、つづいてβ-Arrestinが結合し細胞膜上の受容体が細胞質内へ移動します。

Figure 1. β-Arrestin-GFPの細胞内移動





β-Arrestinを蛍光ラベルすることで、細胞質中のレセプター-β-Arrestin複合体をモニターすることができます。Transfluorアッセイでは、蛍光ラベルβ-ArrestinとGPCRの双方を発現させた組み換え細胞により、活性化レセプターが引き起こす蛍光の量的移動をイメージングシステムで評価することで、リガンドのスクリーニングに利用します。


Transfluorは、90種類以上のGPCRで評価されており、Gタンパク質との相互作用に関わらず、ほとんどのGPCRで利用することができます。


TransfluorアッセイのGタンパク質との作用様式に依存しないという特徴は、オーファンGPCRのスクリーニングに最適です。Ligand Independent Translocation(LITe)アッセイは、オーファンGPCRでもβ-Arrestinのトランスロケーションを評価するリガンド非依存的アッセイを構築します。

Figure 2. リガンド添加後のTranfluor細胞






*Transfluorの細胞およびプラスミドの利用には、カナダ MDS Analytical technologiesとTransfluorライセンス契約が
 
必要です。
*Renilla GFPの利用にはProlume Corporationと使用ライセンス契約が必要です。
*GFPを利用した細胞内のタンパク質再分布測定には、Biolmage A/SとRedistribution利用ライセンスが必要です。


ご不明な点はモレキュラーデバイスまでお問い合わせ下さい。


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