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仕様
PatchXpress
OpusXpress

電位依存性イオンチャネルの測定だけでなく、
リガンド依存性イオンチャネルの測定も可能に!


IonWorks Barracudaは、これまでのIonWorksと同じくフラスコから細胞を剥がして装置にセットするだけで簡単にイオンチャネル電流が測定できます。マニュアルパッチクランプ法のような煩雑な操作は必要ありません。電位依存性イオンチャネルの測定はもちろんのこと、これまで測定が難しかったリガンド依存性イオンチャネルの測定も可能になりました。

  • 平面パッチクランプ法
  • IonWorks Barracuda用384ウェル平面電極(PatchPlate)
  • 384ウェル化合物プレートから384ウェルピペッターで一斉化合物分注
  • 384個のパッチクランプアンプで384ウェル一斉電流測定
  • Perforatedパッチクランプモード
  • 独自のリーク電流補正機能
  • マニュアルシステムとオートメーションシステム(オプション)
  • 6912データ/日(マニュアルシステム・Single-Point screening)



Polulation Patch Clamp(PPC)テクノロジー

測定に使用する平面電極(PatchPlate)は、新しく384ウェル化合物プレートと同じフォーマットにデザインされ、1ウェルに1つの穴が開いているSingle Hole(SH)プレートと、1ウェルに64つの穴が開いているPopulation Patch Clamp(PPC)プレートの両方が使用できます。
SHプレートでは細胞1個の状態が測定できるため、アッセイの最適化や細胞クローンの選択に使用します。PPCプレートでは最大64個の細胞平均イオンチャネル電流値が測定できるため、ウェル間で均一な電流測定が可能になり、化合物スクリーニングに使用します。

ASIC1aの測定例 - SHプレート(左)、PPCプレート(右)





実験の流れ



1. オートメーションシステム(オプション)では、自動で細胞混濁液を調整する機能が追加され、ロボットやスタッカーと接続して長時間無人運転が可能になります。マニュアルシステムからのアップグレードも可能です。

2. 細胞混濁液は一旦CellPettorによってCellBoatに分注されてから、384ウェルピペッターによって一斉にPatchPlateに分注されます。一旦CellBoatに分注することによって、一回の実験に使用する液量を少なくしています。

3. 384ウェルピペッターは使い捨てチップを使用します。化合物の持越しを防ぎます。

4. PatchPlateの上にElectrode-Plateを被せて384ウェルを一斉化合物分注・電流測定を行います。

5. ピペットチップとElectrode-Plateの洗浄を行います。超音波洗浄も可能です。








Assay DevelopmentモードとScreeningモード

ソフトウェアには新しくAssay DevelopmentモードとScreeningモードの2つのモードが選択できるようになりました。これまでのIonWorksでは、1回の実験で1つの電圧プロトコルしか実行することができませんでしたが、(Screeningモード)、Assay Developmentモードでは1回の実験で複数の電圧プロトコルを実行する事ができるようになります。これによってアッセイの最適化に要する手間と時間を大幅に短縮する事できます。





アプリケーション

  • リガンド依存性イオンチャネル…GABA1a・α1nAChR・ α7nAChR
  • 電位依存性イオンチャネル…hERG・Nav1.5・Kv1.3
  • その他…TRPV4・CFTR
  • 細胞…CHO・HEK・CHL

(左:ASIC1a、右:hERG)


仕様*

IonWorks Barracuda

アプリケーション

1次スクリーニング、2次スクリーニング、リード化合物の最適化、
初期毒性スクリーニング

電圧固定方法

バーフォレート・パッチクランプ

電極の種類

ポリイミド

記録チャンバー数

384

細胞の種類

培養細胞

標準成功率

SHモード:60-90%
PPCモード:>95%

データポイント数(6時間1日)
6912
測定可能なイオンチャネルの種類
VGIC、LGIC(*)
溶液ピペットの種類
使い捨てプラスティック
溶液ピペットの数
384
溶液添加中の記録
可能
シール抵抗値
0.05-1GΩ
アクセス(シリーズ)抵抗値(Ra)
10-15MΩ
設置要件 (機器の構成により変わる可能性があります)
機器寸法、重量
122(幅)x84(奥行)x183(高) cm、408kg
電源、消費電力
90-240VAC、50/60Hz、900VA

*VGIC=Voltage-Gated Ion Channels(電位依存性イオンチャネル)、
 LGIC=Ligand-Gated Ion Channels(リガンド作動性イオンチャネル)
*仕様は予告無く変更されることがあります.



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