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ラベルフリーセルベースアッセイシステム


CellKeyシステムは、生細胞内外の高周波に対する電気抵抗変化を測定することにより、薬剤添加前後の細胞の形態変化をリアルタイムでモニターし受容体応答やシグナル伝達を解析するシステムです。

蛍光試薬などを全く使用せず、内因性受容体の高感度なアッセイが可能です。シングルアッセイで3種類のGPCRの活性化が同時に判別でき、チロシンキナーゼ受容体の活性化も測定可能です。


CellKey System動画でのご紹介はこちら(英語)

テクニカルセミナーにて、CellKeyシステムの詳しいご紹介、国内ユーザー様からの
測定結果のご報告がありました。



特徴

高信頼性の内在性、発現系受容体のセルベースアッセイテクノロジー

ラベルフリー:蛍光試薬やタグ等の標識試薬が不要

一度のアッセイで3種類のGPCR、 TKR(チシロンキナーゼ受容体)の活性化を同時に測定
発現系ならず、内因性受容体の応答やシグナル伝達経路のプロファイリングが可能
細胞株毎のターゲットの活性をモニターすることにより、アッセイ開発を簡素化
ユーザーフレンドリーな統合システムにより、容易かつ迅速に測定
ユニバーサルプラットフォーム
96ウェル専用機に加え、384ウェルフォーマット対応型が新たに登場



生物反応解析のためのシステム

蛍光試薬などによるラベルを必要とせず、細胞のインピーダンス(高周波に対する電気抵抗)の変化を測定、解析します。

細胞の形態や機能の変化をリアルタイムで精密にモニターします。



図1. ウェル内の電流の流れ

各ウェルの底に二本の電極を敷いた専用のプレート上で培養した細胞に交流電流をかけると、主として周波数の低い電流は電極間の細胞の外側(extracellular current, iec)を、周波数の高い電流は細胞の内部(transcellular current, itc)を通り抜けます。







GPCRタイプの判別

シグナル形状の違いにより3種類のGPCRの同定が可能です。

cAMPが2次メッセンジャーがである場合もそのまま測定可能です。


図2. CHOm1細胞におけるGPCRサブタイプ毎の反応プロフィール

Muscarinic M1 (transfected, Gq) Serotonin 5HT1B (endogenous, Gi)
EGFR (endogeneous TKR) Prostanoid EP4 (endogenous, Gs)



GqGPCRはリガンド投与後にいったん低下し、その後増加、GiGPCRはリガンド投与後に増加、GsGPCRはリガンド投与後に低下することが示されています。



発現受容体のヒット解析

発現系はもちろん、内因性受容体を用いたアッセイが可能です。

接着性細胞、浮遊性細胞での測定が可能です。

細胞株毎の受容体リストを作成し、Ziecの変化を見ることにより、どのリガンドがヒットしたかを容易に特定できます。


シグナル伝達系の解析

阻害剤等で細胞を前処理することにより、受容体の下流にある情報伝達の解析を行えます。



再現性と操作性

迅速なカイネティックアッセイ結果はわずか15分以下

測定中の同時分注により情報のロスなしに貴重な迅速カイネティック応答データを捉えます

セルベースカイネティックスクリーニングのためのより高速かつハイスループットのラベルフリー、スクリーニング互換フォーマット
−通常8時間で24,600ウェル(CellKey384システム)
小さな卓上専有面積で、試薬サンプルも微量化できます
CellKey384システムはアッセイスループットとランニングコスト改善を考慮し、チップウォッシャー機能を内蔵!







仕様*
CellKey 96システム
(商品番号:1019185)
CellKey 384 システム
(商品番号: 1030049)
測定原理
インピーダンス
測定周波数
1kHz-10MHz
アッセイタイプ
ホモジニアス、ラベルフリー、セルベース
測定モード
液体添加と同時に測定

エンドポイント、カイネティック
測定間隔
2または10秒
4または20秒
液体ハンドリング
規格
分注速度
ピぺットの位置
コンパウンドミックス
分注量

96チャンネルピペットヘッド
調節可能
調節可能
可能
0-200μL

384チャンネルピペットヘッド
調節可能
調節可能
可能
0.5-25μL
温度調節
解析時
設置条件

室温+5℃〜+37℃
デッキ位置
測定プレート
コンパウンドプレート
チップローディング
4ヶ所
1ヶ所
2ヶ所
1ヶ所
設置要件

機器寸法(cm)、重量(kg)

85(幅)x58(奥行)x71(高)、128

100(幅)×58(奥行)x70(高)、144

電圧(V)
100-240
電流(A)
12.2(100V)
周波数(Hz)
50/60
(最大)消費電力(W)
630W
700W
備考 コンピューターのスペースとして61cmが必要です。 コンピューターのスペースとして61cm、Tip Wash Control Unit用に81cm必要です。

*仕様は予告無く変更されることがあります.



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